蔗糖（sucrose）含量試劑盒說明書

微量法 100 管/96 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

蔗糖是植物光合作用的主要產物，也是糖分運輸和儲藏的主要形式。因此，測定蔗糖含量對于植物糖代謝具有重要意義。此外，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產品質量控制的重要指標之一。

測定原理：

先用堿與樣品共熱，破壞其中的還原糖。然后在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖進一步與間苯er酚反應，生成有色物質，在 480nm 下有特征吸收峰。

蔗糖（sucrose）含量試劑盒   淀粉系列

組成：

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

蔗糖提取：

稱取 0.1~0.2g 樣本，常溫研碎，加入 0.5ml 提取液，適當研磨后快速轉移到離心管中，置于 80℃水浴鍋中 10min，振蕩 3~5 次，冷卻后，4000g，常溫離心 10min，取上清，加入 2mg 試劑五，80℃脫色 30min，再加入 0.5ml 提取液，冷卻后，4000g，常溫離心 10min，取上清液測定。

測定步驟：

1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 480nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定，（在EP 管中依次加入下列試劑）：

混勻，沸水浴煮沸 5min 左右（蓋緊，防止水分散失）

混勻，沸水浴 30min，冷卻后取 200μl 至微量石英比色皿或 96 孔板中測定 480nm 處光吸收值，空白管、標準管和測定管分別記為A1、A2 和A3。空白管和標準管只要做一管。

蔗糖含量計算：

1、按照蛋白質含量計算

蔗糖含量(mg/mg prot)=(C 標準管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行測定蛋白濃度。

2、按照樣品質量計算

蔗糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標準管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷W。

C 標準管：標準管濃度，1mg/ml；V1：加入樣本體積，0.025ml；V2：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。

注意：zui低檢測限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot

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